Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Осмысление метода иммуноферментного анализа возможно благодаря пониманию реакции «антиген — антитело». Непригодные для организма молекулы, зачастую белкового происхождения, которые могут попасть в инфицированный организм, называются антигенами. Кроме того, частицы крови, не совпадающие с собственной группой, также могут являться антигенами. В свою очередь, антигены могут вызвать иммунную реакцию, направленную на защиту внутренней среды человека от неизвестных веществ. Процесс реакции «антиген — антитело» заключается в синтезе антител (иммуноглобулины) организмом, которые могут связаться с антигеном, образовав иммунный комплекс. Клетки иммунной системы легче распознают такие комплексы и уничтожают их.

Обзор основных показателей

Один из способов определить наличие инфекционного процесса в организме - это анализ на наличие класса иммуноглобулинов. Существует несколько видов иммуноглобулинов, которые можно использовать для анализа заболевания: IgM, IgA и IgG.

Присутствие IgM свидетельствует о наличии острого инфекционного процесса в организме. Если IgM не выявлено, это может указывать на то, что в организме отсутствует конкретный возбудитель, либо же инфекция перешла в хроническую стадию.

Если результат теста на IgM отрицательный, а уровень IgA повышен, это обычно свидетельствует о реинфекции, хроническом или скрыто протекающем заболевании.

Если же обнаружены оба класса иммуноглобулинов - IgM и IgA, это может указывать на разгар острого периода заболевания.

Наличие IgG может говорить о хронизации заболевания, либо о том, что организм выработал иммунитет к инфекционному агенту и начал выздоравливать.

Выводы о состоянии здоровья человека следует делать на основе результатов всего комплекса анализов и сведений о состоянии здоровья в целом.

Возможные результаты ИФА

В сданном на анализ образце, ИФА может выявить наличие или отсутствие антител и антигенов в зависимости от того, какая информация была указана в заполненном бланке. Результаты могут быть представлены в виде таблицы, где все антитела и антигены будут перечислены с обозначением отрицательной или положительной реакции, или в виде количественного значения. В последнем случае будет указано количество содержащихся антител в данном образце.

Еще одним количественным показателем может быть индекс авидности антител, выраженный в процентах. Этот показатель определяет, сколько времени прошло с начала инфекционного процесса. Чем выше этот индекс, тем больше времени прошло с момента инфицирования.

Сегодня разрабатываются тысячи различных тест-систем ИФА, которые позволяют обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных заболеваниях. Поэтому, ИФА широко используется в медицине для диагностики большинства патологических состояний. Простой и быстрый анализ помогает назначить правильную терапию для эффективного лечения заболевания.

Классификация антител и их роль в иммунном ответе

Антитела являются важной частью иммунной системы человека. Они играют ключевую роль в противостоянии инфекционным заболеваниям, благодаря способности связываться с антигенами - веществами, вызывающими иммунный ответ. Существует несколько видов антител, каждое из которых активизируется на своей стадии иммунного ответа.

Первыми проявляются иммуноглобулины класса M (IgM) - самые крупные молекулы антител. Их содержание в крови резко возрастает на ранней стадии инфекции. За ними следует появление иммуноглобулинов класса G (IgG), которые помогают к организму начать уничтожение антигенов, а также продолжают циркулировать после болезни, обеспечивая иммунитет от повторного заражения.

Кроме того, в состав антител входят иммуноглобулины класса A (IgA), которые находятся в большом количестве в слизистых оболочках организма и представляют собой первую линию защиты от инфекций, а также иммуноглобулины класса E (IgE), которые играют важную роль в борьбе с паразитарными инфекциями и аллергическими реакциями.

Для лабораторной диагностики в основном используются IgM, IgG и IgA. Концентрация каждого из этих видов антител позволяет судить о том, на какой стадии находится инфекционный процесс и было ли у человека ранее данное заболевание (к примеру, краснуха или ветряная оспа). Благодаря прививкам, которые содержат ослабленные антигены микробов и вирусов, появляется большое количество IgG в крови, что при контакте с реальной угрозой быстро подавляет инфекцию до того, как она нанесет вред здоровью.

Иммуноферментный анализ – что это такое?

Одна из главных задач врача – правильно идентифицировать причину заболевания. Когда диагноз неочевиден, врачи часто назначают иммуноферментный анализ пациенту для измерения концентрации гормонов или определения наличия инфекции в организме. Иммуноферментный анализ помогает узнать, какие антигены или антитела содержатся в организме человека.

Реакцию, известную как «антиген-антитело», можно воспроизвести в лабораторных условиях, используя антитела или антигены для определения наличия соответствующих соединений в образце.

При проведении иммуноферментного анализа лаборатория получает образец биологической жидкости – обычно это сыворотка крови. Затем, используя пластиковые планшеты с лунками, в которых находятся очищенные антигены предполагаемого возбудителя или антитела, лаборатория проводит реакцию. Если антиген вступает в контакт с антителом, образуется иммунный комплекс. При этом специальное красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, и результаты анализа определяются инструментальной оценкой оптической плотности.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае анализ дает однозначный ответ на наличие или отсутствие вещества в образце. Во втором случае используются более сложные реакции для определения концентрации антител в крови. Это позволяет более точно оценить характер развивающегося заболевания.

Еще одним важным плюсом иммуноферментного анализа является его безопасность для сотрудников лаборатории. До появления ИФА врачи использовали радиоиммунный анализ, который мог представлять опасность для здоровья диагностического персонала. Изобретение ИФА в 1971 году существенно улучшило безопасность анализа и позволяет врачам делать более точные диагнозы.

Какие преимущества у метода ИФА?

Метод ИФА (иммуноферментный анализ) – это эффективный и чувствительный метод диагностики многих заболеваний, который позволяет точно идентифицировать антитела или антигены в крови. Он имеет множество преимуществ перед другими методами диагностики.

Высокая чувствительность. Одним из основных преимуществ метода ИФА является его высокая чувствительность. Это значит, что метод позволяет распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока.

Высокая специфичность. Ещё одним преимуществом ИФА является его высокая специфичность. Это означает, что метод позволяет производить диагностику без ошибок. Если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не какие-то другие.

Возможность определить заболевание на ранней стадии. Одним из главных преимуществ метода ИФА является возможность определить заболевание на ранней стадии. Метод ИФА во многом заменил золотой стандарт микробиологии – бактериологический метод диагностики. Благодаря ИФА, для идентификации возбудителя достаточно обнаружить IgM-антитела в крови. Это значительно повышает точность диагностики и позволяет начать лечение на ранних этапах болезни.

Низкая вероятность ошибки. В методе ИФА снижается вероятность ошибки благодаря высокой степени технологичности проведения анализа, минимизирующей влияние человеческого фактора. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Минусы данного метода

В ходе проведения иммуноферментного анализа (ИФА) необходимо знание, что конкретно искать, так как методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому, для преднамеренного «угадывания» диагноза, нет необходимости назначать такой тест.

Для выявления возбудителя и определения его специфичных свойств при диагностики инфекционных заболеваний, ИФА неспособен. Этот метод лишь показывает наличие антител в крови пациента, непосредственно указывающих на наличие инородного микроорганизма в организме.

Несомненно, ИФА является высокоточным методом, однако он не является самым дешевым, поэтому для правильного его применения, необходимо подходить умным образом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Назначение и обнаружение заболеваний с помощью ИФА анализа имеет множество показаний, особенно для диагностики инфекционных заболеваний, аутоиммунных заболеваний и определения уровня гормонов в крови. Некоторые из многочисленных целей анализа включают:

• Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
• IgM и IgG к вирусным гепатитам A, B, C, D и E;
• IgG к ВИЧ;
• IgM и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
• IgM и IgG к вирусу Эпштейна — Барр;
• IgM и IgG к герпетическим инфекциям;
• IgM и IgG к токсоплазмозу;
• IgM и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
• IgG к паразитарным заболеваниям;
• IgM и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
• IgG к хеликобактерной инфекции.
• Оценка присутствия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
• Обнаружение онкологических маркеров, таких как простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и другие.
• Определение содержания гормонов в сыворотке крови, таких как прогестерон, пролактин, тестостерон, тиреотропный гормон и другие.

Анализ биоматериала и сбор образца

Сыворотка крови является основным биоматериалом для проведения ИФА. В лаборатории берут образец крови из вены у пациента и удалют форменные элементы, что может затруднить проведение анализа. Для некоторых других случаев может использоваться спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Чтобы избежать искажений результатов анализа, рекомендуется сдавать кровь на пустой желудок и отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов за две недели до исследования, если целью является диагностика хронических инфекционных заболеваний, которые протекают скрыто.

Смотрящий срок готовности результатов ИФА

Если на складе имеются нужные реактивы и сбалансированная организация работы лаборатории, время ожидания результатов анализа может составить один или два рабочих дня после взятия крови. В случае, когда требуется получение экстренного ответа, этот период может быть сокращен до двух-трех часов.

Пояснительной информацией по иммуноферментному анализу (ИФА) является, что его качественный результат сохранит однозначный ответ, который сообщит, найдено ли искомое вещество в образце или же нет. Если речь идет о количественном анализе на основе ИФА, то концентрацию можно выразить численным значением или в виде соответствующего количества знаков "+" (которых может быть от одного до нескольких).

Фото: freepik.com